สารออกฤทธิ์ทางชีวภาพจากราเอ็นโดไฟท์ที่แยกได้จากใบเปล้าน้อย

Titleสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพจากราเอ็นโดไฟท์ที่แยกได้จากใบเปล้าน้อย
Publication TypeReport
Year of Publication2007
Authorsพรภคกุล, สุรชัย
Series Editor-
Series Title-
Date Published2007
Institutionจุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย
City-
Typeโครงการวิจัย
Report NumberMRG4780172
ISBN NumberMRG4780172
Keywordsbioactive compounds, endophyte, endophytic fugi, metabolites
Abstract

ราเอ็นโดไฟท์เป็นจุลชีพที่บางส่วนของวงชีวิตหรือทั้งวงชีวิตอยู่ภายในเนื้อเยื่อพืชที่ให้อาศัยโดยอยู่ระหว่างหรือภายในเซลล์ซึ่งรานี้จะไม่เป็นสาเหตุให้เกิดอาการของโรคพืชปรากฏ มีการรายงานว่าสารต้านมะเร็งหลายชนิด เช่น แพคลิแท็กเซล (taxol?), สารปฏิชีวนะ, สารปฏิชีวนะระเหย, สารฆ่ารา, สารฆ่าวัชพืช, สารฆ่าสาหร่าย, สารกดภูมิคุ้มกัน, และสารฆ่าพยาธิตัวกลม สร้างขึ้นโดยราเอ็นโดไฟท์ ด้วยเหตุนี้ ราเอ็นโดไฟท์จึงคาดหวังว่าเป็นแหล่งสำคัญสำหรับสารออฤทธิ์ทางชีวภาพจากธรรมชาติชนิดใหม่ที่นำมาใช้เพื่อการพัฒนายาและที่เป็นเครื่องมือในการวิจัย ดังนั้นวัตถุประสงค์นี้ก็เพื่อแยกราเอ็นโดไฟท์จากในเปล้าน้อย Croton sublyratus เพื่อศึกษาการสร้างเปลาโนทอลจากราเอ็นโดไฟท์ เพื่อแยกสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพที่สร้างจากราเอ็นโดไฟท์และศึกษาฤทธิ์ทางชีวภาพที่ของสารเหล่านั้น การแยกราเอ็นโดไฟท์จากใบเปล้าน้อยที่เก็บจากนครปฐม ลพบุรีและกรุงเทพ โดยอาศัยเทคนิคการทำให้ปลอดเชื้อที่พื้นผิวได้ราเอ็นโดไฟท์ 20, 50 และ 16 ไอโวเลต ตามลำดับ ราเหล่านี้นำมาศึกษาการสร้างเปลาโนทอลและการออกฤทธิ์ต้านจุลชีพ Bacillus subtilis ATCC 6633, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 และ Canida albicans ATCC 10231 โดยใช้วิธี dual culture diffusion พบว่าราทั้งหมดไม่สร้างเปลาโนทอลและมีเพียงสี่ไอโซเลตเท่านั้นที่มีฤทธิ์ต้านจุลชีพอย่างอ่อน จากการพิจารณาการสร้างสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพด้วยการวิเคราะห์ 1H NMR ของเมแทบอไลท์ของราที่สร้าง จึงเลือกได้สามไอโซเลตเพื่อการศึกษาเพิ่มเติม ราเอ็นโดไฟท์ BKK3 วิเคราะห์ได้ว่าเป็นรา Diaporthe sp. ชนิดที่เป็นเส้นใย แยกได้สารยับยั้ง CYP3A4 ชนิดใหม่, phomopsichalasin B, รวมทั้ง pycnidione จากเส้นใยของรานี้ ทำการวิเคราะห์โครงสร้างสารเหล่านี้โดยอาศัยของมูลทางสเปกโทรสโกปีและโครงสร้าง phomopsichalasin B ยืนยันโดยการวิเคราะห์ด้วยเอกซ์-เรย์คริสทัลโลกราฟี Phomopsichalasin B และ pycnidione มีฤทธิ์การยับยั้ง CYP3A4 ด้วย IC50 0.626 ?M and 465 ?M, ตามลำดับ

Endophytic fungi are microorganisms which spend the whole or part of its life cycle colonizing inter- and/or intra-cellularly inside the healthy tissues of the host plant causing no appearance of disease symptoms. There are documents demonstrating that many antitumor agents, such as paclitaxel (taxol?), antibiotics, volatile antibiotics, fungicidal, herbicidal, algicidal, immunosuppressive compounds, and nematocidals could be produced by endophytic fungi. Thus, the endophytic fungi are expected to be a potential source for new natural bioactive agents used for the development of drugs and as research tools. Therefore, the objectives of this research were to isolate endophytic fungi from Croton sublyratus leaves, to investigate plaunotol production from the endophytic fungi, to isolate bioactive compounds produced from the endophytic fungi and investigate their activties. Isolation of endophytic fungi from the leaves of Croton sublyratus, collected from Nakhonpathom, Lopburi and Bangkok, using surface-sterilization technique gave 20, 50 and 16 isolates of endophytic fungi, respectively. These fungi were investigated for production of plaunotol and anti-microbial activity against Bacillus subtilis ATCC 6633, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 and Canida albicans ATCC 10231 using dual culture diffusion method. It found that all fungi produced no plaunotol and only four isolates exhibited weak antimicrobial activity. 1H NMR analysis of their metabolites was considered for production of bioactive compounds and three isolates were selected for further investigation. The endophytic fungus isolate BKK3 was identified as the filamentous fungus Diaporthe sp. A novel CYP3A4 Inhibitor, phomopsichalasin B, together with pycnidione were isolated from the mycelia of this fungus. Their structures were elucidated on the basis of spectral data and the structure of phomopsichalasin B was confirmed by X-ray crystallographic analysis. Phomopsichalasin B and pycnidione exhibited CYP3A4 Inhibition with IC50 0.626 ?M and 465 ?M, respectively.

URLhttp://elibrary.trf.or.th/project_content.asp?PJID=MRG4780172
Alternate TitleBioactive compounds from Endophytic fungi isolated from Croton sublyratus leaves